"톨루엔, 콜타르, 클로로벤젠의 생물학적 노출지표물질 분석에 관한 지침(H-8, 12, 13)"에 대해, 다음 순서로 살펴보자.
1) 톨루엔 분석
2) 콜타르 분석
3) 클로로벤젠 분석
톨루엔 분석
시료 채취
톨루엔 분석을 위한 시료 채취는 소변 또는 혈액을 통해 이루어진다. 소변 시료는 당일 작업 종료 2시간 전부터 작업 종료 시점 사이에 채취하며, 혈액 시료도 동일한 시간대에 채취한다. 시료 채취 시에는 몇 가지 주의 사항을 따라야 한다. 소변 시료는 밀봉 가능한 용기에 10mL 이상 채취하고, 4℃에서 보관하며 5일 이내에 분석해야 한다. 5일 이상 보관해야 할 경우에는 냉동 보관해야 한다. 혈액 시료는 EDTA나 헤파린 처리된 유리 용기에 90% 이상 채취하고, 4℃에서 보관하며 5일 이내에 분석해야 한다.
분석 방법
소변 중 톨루엔 분석 방법에는 가스크로마토그래피 불꽃이온화검출법(GC-FID)과 헤드스페이스 가스크로마토그래피 질량분석검출법(HS GC-MS)이 있다. GC-FID는 소변 시료를 가수분해시킨 후 유기용제로 추출하여 분석하는 방법이고, HS GC-MS는 소변 시료를 헤드스페이스 GC 바이알에 넣고 가열하여 기체 상태의 톨루엔을 분석한다. 혈액 중 톨루엔 분석 방법에는 헤드스페이스 가스크로마토그래피 불꽃이온화검출법(HS GC-FID)이 사용된다. 혈액 시료를 헤드스페이스 GC 바이알에 넣고 가열하여 기체 상태의 톨루엔을 분석한다.
농도 계산
소변 중 톨루엔의 농도는 GC-FID 또는 HS GC-MS 분석 결과를 이용하여 계산한다. 혈액 중 톨루엔의 농도는 HS GC-FID 분석 결과를 이용하여 계산한다. 소변 및 혈액 중 톨루엔 농도 둘 다 검량선용 표준용액의 농도와 피크 면적을 이용하여 검량선을 그리고, 시료의 피크 면적을 검량선에 대입하여 농도를 계산한다. 소변 중 톨루엔의 생물학적 노출기준은 0.8 mg/g 크레아티닌이고, 혈액 중 톨루엔의 생물학적 노출기준은 0.05 mg/L이다.
콜타르 분석
시료 채취
콜타르 분석을 위한 시료는 소변을 통해 채취한다. 4~5일간 연속 작업 후, 작업 종료 2시간 전부터 작업 종료 직후까지 채취한다. 시료는 오염되지 않고 밀봉 가능한 용기에 10mL 이상 채취한다. 콜타르는 햇빛에 의해 분해될 수 있으므로, 냉동 보관하거나 갈색병에 넣어 보관해야 한다.
분석 방법
소변 중 콜타르의 대사산물인 1-하이드록시파이렌을 분석한다. 1-하이드록시파이렌은 대부분 글루쿠론산과 결합된 형태로 배출되므로, 효소 반응을 통해 유리형으로 전환한 후 분석한다. 고상 카트리지를 이용하여 1-하이드록시파이렌을 분리하고 농축한 후, 고성능액체크로마토그래프-형광검출기(HPLC-FD)로 분석한다.
농도 계산
HPLC-FD 분석 결과를 이용하여 1-하이드록시파이렌의 농도를 계산한다. 톨루엔 농도를 계산하는 방법과 마찬가지로, 검량선용 표준용액의 농도와 피크 면적을 활용해 검량선을 그린 후, 시료의 피크 면적을 검량선에 대입하면 농도를 계산할 수 있다. 소변 중 1-하이드록시파이렌의 생물학적 노출기준은 4.6 µg/L이다.
클로로벤젠 분석
시료 채취
클로로벤젠 분석을 위한 시료는 소변을 통해 채취한다. 당일 작업 종료 2시간 전부터 작업 종료 시점 사이에 채취한다. 시료는 밀봉 가능한 용기에 10mL 이상 채취하고, 4℃에서 보관하며 5일 이내에 분석해야 한다. 5일 이상 보관해야 할 경우에는 냉동 보관한다.
분석 방법
소변 중 클로로벤젠의 대사산물인 4-클로로카테콜을 분석한다. 4-클로로카테콜은 대부분 황산이나 글루쿠론산과 결합된 형태로 배출되므로, 효소 반응을 통해 유리형으로 전환한 후 분석한다. 고성능액체크로마토그래프-자외선검출기(HPLC-UVD)를 이용하여 분석한다.
농도 계산
HPLC-UVD 분석 결과를 이용하여 4-클로로카테콜의 농도를 계산한다. 시료의 클로로벤젠 농도는 톨루엔, 콜타르와 같은 방법으로 검량선을 활용하여 계산한다. 소변 중 4-클로로카테콜의 생물학적 노출기준은 150 mg/g 크레아티닌이다.
요약 정리
1) 톨루엔은 소변 또는 혈액, 콜타르와 클로로벤젠은 소변을 통해 시료를 채취하여 분석한다.
2) 톨루엔은 GC-FID, HS GC-MS, HS GC-FID를 이용하여 분석하고, 콜타르는 HPLC-FD를 이용하여 분석하며, 클로로벤젠은 HPLC-UVD를 이용하여 분석한다.
3) 각 물질의 생물학적 노출기준값은 톨루엔 0.8 mg/g 크레아티닌(소변) 및 0.05 mg/L(혈액), 콜타르 4.6 µg/L, 클로로벤젠 150 mg/g 크레아티닌이다.
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